期刊简介
1995年创刊，中华医学会主办，读者对象为从事肝胆胰脾外科专业的医疗、教学、科研工作者,范围包括肝、胆、胰、脾外科疾病、门脉高压、外科营养等临床防治与实验研究。主要栏目：述评、热点聚焦、学术思考、论著、实验研究、短篇论著、病例报告、综述等。该刊自1999年起成为 “中国科技核心期刊”，2011年再次被北京大学图书馆《中文核心期刊要目总览》收录。杂志影响因子逐年上升，是国内外同行了解我国肝胆胰脾外科专业现状和趋势的重要资料源和途径。 80页，单价18元。统一刊号CN11-3884/R，邮发代号82-857。
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首页>中华肝胆外科杂志
- 杂志名称：中华肝胆外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-8118
- 国内刊号：11-3884/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 上海图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏
可诱导表达RN181逆转录病毒载体的构建及其在肝癌细胞中的表达
李坤平；王穗海；罗小仔；梁志坚；陈武业；方永平
关键词：肝癌, 锌指蛋白, RN181, 蛋白表达
摘要：目的 构建可诱导表达RN181的逆转录病毒载体,探讨其在肝癌细胞中的表达,为进一步研究RN181基因的生物学功能奠定基础.方法 基于基因克隆技术,构建pRetrox-TRE3 G/RN181重组载体.常规鉴定后,反应质粒pRetroX-TRE3 G/RN181和调控质粒pRetroX-Tet3G分别与Envelope Vector共转染GP2-293细胞包装逆转录病毒.两种病毒共同感染目的细胞SMCC7721,经G418筛选得到稳定细胞株.加强力霉素(Dox)诱导表达RN181,经实时荧光PCR (RT-PCR)、蛋白印迹检测(Western blotting)鉴定后,CCK-8实验和Transwell检测细胞增殖和侵袭情况.结果 重组载体经测序证实构建成功.筛选出的阳性克隆在Dox诱导下,经RT-PCR、Western blotting鉴定证实重组细胞中RN181的mRNA及其蛋白表达水平在诱导与未诱导的细胞系间的差异具有统计学意义(P＜0.05).增殖实验显示Dox诱导后的7721RN181细胞生长减慢.细胞侵袭实验显示RN181上调后细胞侵袭力减弱.结论 我们成功构建的可诱导表达RN181的SMCC7721-RN 181重组细胞系为研究RN181的生物学功能提供了有效的细胞模型.研究初步证实了RN181在体外对SMCC7721细胞增殖和侵袭的抑制作用.
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