期刊简介
1995年创刊，中华医学会主办，读者对象为从事肝胆胰脾外科专业的医疗、教学、科研工作者,范围包括肝、胆、胰、脾外科疾病、门脉高压、外科营养等临床防治与实验研究。主要栏目：述评、热点聚焦、学术思考、论著、实验研究、短篇论著、病例报告、综述等。该刊自1999年起成为 “中国科技核心期刊”，2011年再次被北京大学图书馆《中文核心期刊要目总览》收录。杂志影响因子逐年上升，是国内外同行了解我国肝胆胰脾外科专业现状和趋势的重要资料源和途径。 80页，单价18元。统一刊号CN11-3884/R，邮发代号82-857。
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首页>中华肝胆外科杂志
- 杂志名称：中华肝胆外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-8118
- 国内刊号：11-3884/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 上海图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏
shRNA干扰KAP-1基因表达对胰腺癌肿瘤干细胞自我更新的影响
江建新；詹磊；潘耀振；孙诚谊
关键词：胰腺肿瘤, 干细胞, 基因表达
摘要：目的 研究KAP-1对胰腺癌肿瘤干细胞自我更新能力的影响.方法 采用免疫组织化学方法检测14例胰腺癌组织标本和配对癌旁组织标本KAP-1蛋白的表达情况.PCR扩增KAP-1 shRNA干扰序列,克隆至pGC-LV慢病毒表达载体；双酶切及测序鉴定正确后进行慢病毒包装与滴度检测.构建成功后感染人胰腺癌细胞株Panc-1细胞48 h后,通过Western blot实验和RT-qPCR实验检测KAP-1的表达量以及该细胞系相关EMT标志蛋白波形蛋白的表达.采用悬浮法培养人胰腺癌Panc-1细胞生成肿瘤干细胞球,通过测定初代以及次代肿瘤干细胞球的成球直径和数量判断KAP-1基因敲减对肿瘤干细胞球成球能力及自我更新能力的影响.结果 在14例胰腺癌组织标本和癌旁组织标本的免疫组织化学检测中,胰腺癌组织标本KAP-1阳性数为13例(P=0.002).构建的慢病毒载体感染细胞48 h后,在倒置荧光显微镜下观察可见绿色荧光.RT-qPCR实验显示感染KAP-1 RNA干扰慢病毒载体的Panc-1细胞KAP-1及EMT标志蛋白波形蛋白的表达量较未感染病毒细胞以及感染空载体细胞显著增高.KAP-1基因敲低表达的人胰腺癌Panc-1肿瘤干细胞球的初代以及次代的成球直径相较于转染空载体的Panc-1肿瘤干细胞球发生明显减小,在成球数量上也明显减少.结论 KAP-1在胰腺癌组织中存在表达,且与正常组织表达量具有明显差异.构建了高效稳定表达KAP-1的RNA干扰慢病毒转染系统.KAP-1转录因子表达量降低可以减弱人类胰腺癌细胞Panc-1细胞系生成干细胞球的自我更新能力.其机制可能与敲低KAP-1表达影响波形蛋白下调有关.
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