期刊简介
1995年创刊，中华医学会主办，读者对象为从事肝胆胰脾外科专业的医疗、教学、科研工作者,范围包括肝、胆、胰、脾外科疾病、门脉高压、外科营养等临床防治与实验研究。主要栏目：述评、热点聚焦、学术思考、论著、实验研究、短篇论著、病例报告、综述等。该刊自1999年起成为 “中国科技核心期刊”，2011年再次被北京大学图书馆《中文核心期刊要目总览》收录。杂志影响因子逐年上升，是国内外同行了解我国肝胆胰脾外科专业现状和趋势的重要资料源和途径。 80页，单价18元。统一刊号CN11-3884/R，邮发代号82-857。
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首页>中华肝胆外科杂志
- 杂志名称：中华肝胆外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-8118
- 国内刊号：11-3884/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 上海图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏
shRNA/mrp1表达载体构建及其体外表达研究
潘光栋；严律南；杨建青；褚光平；刘强；肖亿
关键词：基因表达, 多药耐药, 构建
摘要：目的 构建shRNA/mrp1的质粒表达载体并验证其体外表达效率.方法 根据业已筛选出的mrp1基因RNAi靶序列,按照pSUPER的设计要求合成64 bp的寡核苷酸序列,将其退火后形成双链并用双酶切法克隆到pSUPER得到质粒pSUPER-shRNA/mrp1,转染感受态大肠杆菌,筛选阳性克隆,经测序证实后扩增培养并以去内毒素试剂盒提取,然后转染HepG2/mrp1细胞,阴性载体为对照组,Real-time PCR、流式细胞术检测mrp1基因mRNA、MRP1表达、细胞耐药性等功能变化.结果 成功构建质粒载体pSUPER-shRNA/mrp1,经基因测序证实靶序列插入正确;HepG_2/mrp1组Ct值较GAPDH增加5.61,HepG_2/mrp1-si组Ct值比GAPDH升高11.35,mrp1基因的表达水平是耐药株HepG_2/mrp1的179分之一;实验组HepG_2/mrp1细胞和阴性对照组HepG_2/mrp1细胞的MRP表达率分别为11.2%和97.6%,差别有统计学意义(P<0.05);药物敏感试验显示HepG_2/mrp1细胞耐药倍数从45.0下降到1.2,相对逆转效率99.62%;细胞内DNR累积量也明显增加,与对照组比较(78.58%vs 38.44%,P<0.05).结论 成功构建质粒载体pSUPER-shRNA/mrp1,在HepG2/mrp1内稳定表达,逆转其耐药性.
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